共聚焦显微镜(LSM 800)

时间:2021-09-16浏览:163设置

技术指标

(1)基本作用原理 激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope)是在传统光学显微镜基础上,激光扫描共聚焦显微镜用激光作为光源,采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图像处理观察、分析和输出。 其特点是可以对样品进行断层扫描和成像,进行无损伤观察和分析细胞的三维空间结构。 同时,利用免疫荧光标记和离子荧光标记探针,该技术不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可以对活细胞的结构、分子、离子及生命活动进行实时动态观察和检测,在亚细胞水平上观察诸如 Ca2+,pH 值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具,极大地丰富了人们对细胞生命现象的认识。 (2)主要规格及技术指标 主机:电动型正置荧光显微镜(Imager Z1); 物镜倍数:10×、20×、40× 油镜、63× 油镜; 激光器:405nm、488nm、561nm、640nm;

样品注意事项

(1)样本需使用共聚焦相应耗材加载,盖玻片及各类器皿皿底厚度标准为0.17mm。 (2)荧光染料选用原则:需选择与此设备激发波长相匹配的染料;多种染料同时选用,需注意接收波长的范围,2个相近的染料接收波长之间至少要有20-30nm的间隔。荧光染料选择指南可参考:https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/fluorophores.html (3)样本建议加抗淬灭剂;抗淬灭剂的使用可参考以下网站:https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cellular-imaging/fluorescence-microscopy-and-immunofluorescence-if/mounting-medium-antifades.html (4)封片剂:如需使用油镜,建议使用固化封片剂;如使用液封和密封剂(熔解石蜡或指甲油)封片,务必要注意某些密封剂自身会发出荧光,同时还要避免对任何靠近密封剂的区域成像。可参考:https://www.thermofisher.com/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cell-analysis-learning-center/molecular-probes-school-of-fluorescence/imaging-basics/labeling-your-samples/mounting-media.html#what

使用说明

(1)培训须知 ① 培训方式:“一对一”带样品上机操作培训,不定期举办相关的技术应用讲座或小班上机操作培训; ② 仪器预约成功后,需提前联系仪器负责人预约培训,并说明样品情况,包括样品种类、染色方案等; ③ 非工作时间段仅对熟悉该仪器的用户开放预约使用,新用户烦请预约工作时间段; (2)日常维护与故障排除 ① 预约最早时间段的用户需要严格按照操作规程开机;预约最晚时间段的用户使用完仪器后,需严格按操作规程完成关机;中间的用户只需要关闭软件下机,避免多次开关激光,造成激光损耗。 ② 油镜使用完毕后需要用擦镜纸和无水乙醇清洁物镜(附件3)。 ③ 镜下观察可以看到样本,但屏幕软件无法看到:首先,确认光路切换拉杆是否已拉出,切换到电脑;其次,确认参数是否设置在一个可视范围,设置方法可参考附件1;最后,调整显微镜细调至最大焦平面。 ④ 镜下无法观察到样本:首先,检查荧光灯是否已经打开;其次,检查荧光挡板是否在正确位置。 (3)数据拷贝 ① 仪器保存的数据为CZI格式,为了维护电脑系统安全,需用光盘拷贝数据,严禁使用U盘; ② 可使用电脑刻录软件,或将文件复制粘贴至光盘,打开光盘,点击工具栏上的“刻录到光盘”进行刻录。 可提前5天预约,每位用户每天可预约时长为2小时。


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